EL MICROSCOPIO
PARTES E IDENTIFICACION DE ALGUNAS PARTES.
DETERMINACION DE MESOFILOS EN ALIMENTOS
PROCEDIMIENTO DE SIEMBRA.
Se preparo el agar para preparar el cultivo. Se utilizo un agar llamado platecount el cual se utiliza para lograr ver mesofilos y hacer recuento de los mismos, presentes en los alimentos. Se debían prepara tres soluciones con distintas concentraciones entre si. La primera solución lleva 90 ml de agua peptonada y 10 ml de muestra liquida, se representa como 1*10-1. De la primera solución sacamos 1 ml y lo mezclamos con 9 ml de agua peptonada y llamamos a esta solución 1*10-2. De la segunda solución sacamos 1 ml y lo mezclamos con 9 ml de agua paptonada y la llamamos 1*10-3. De cada solución preparada sacamos 1 ml con pipetas diferentes para cada concentración y las agregamos a las cajas petri las cuales anteriormente debían contener de 15 a 20 ml de agar y para cada solución utilizamos una caja petri. Llevamos a incubar las cajas por 48 horas a una temperatura de 37° c.
Se preparo el agar para preparar el cultivo. Se utilizo un agar llamado platecount el cual se utiliza para lograr ver mesofilos y hacer recuento de los mismos, presentes en los alimentos. Se debían prepara tres soluciones con distintas concentraciones entre si. La primera solución lleva 90 ml de agua peptonada y 10 ml de muestra liquida, se representa como 1*10-1. De la primera solución sacamos 1 ml y lo mezclamos con 9 ml de agua peptonada y llamamos a esta solución 1*10-2. De la segunda solución sacamos 1 ml y lo mezclamos con 9 ml de agua paptonada y la llamamos 1*10-3. De cada solución preparada sacamos 1 ml con pipetas diferentes para cada concentración y las agregamos a las cajas petri las cuales anteriormente debían contener de 15 a 20 ml de agar y para cada solución utilizamos una caja petri. Llevamos a incubar las cajas por 48 horas a una temperatura de 37° c.
PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR CONTEO.
Después de pasadas las 48 horas nos disponemos a realizar el conteo de los mesofilos. Con la ayuda de un cuenta colonias contamos las manchas formadas las cuales representan una colonia. Después de realizar el conteo se toma una fracción de la muestra con la ayuda de un asa de siembra y la llevamos a las láminas y le aplicamos una gota de azul de metileno y llevamos al microscopio. Tomamos nota de lo observado, como colores y formas.
Después de pasadas las 48 horas nos disponemos a realizar el conteo de los mesofilos. Con la ayuda de un cuenta colonias contamos las manchas formadas las cuales representan una colonia. Después de realizar el conteo se toma una fracción de la muestra con la ayuda de un asa de siembra y la llevamos a las láminas y le aplicamos una gota de azul de metileno y llevamos al microscopio. Tomamos nota de lo observado, como colores y formas.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
En cada caja se observo homogeneidad de colores y formas a diferencia de la prueba pasada. En una caja se observo una mancha de color blancuzca de gran tamaño la cual estaría formada por miles de colonias. Se observo puntos diminutos que tenían la apariencia de migas de pan.
Se formo una gran mancha y aparte se pudieron contar aproximadamente 60 colonias. Se pudo observar manchas o pintas diferentes a las colonias normales.
De las muestras observadas en el microscopio pudimos observar una mancha blanca que al parecer tenia superficie lisa y una especie de cadena que estaba formada por burbujas.
En cada caja se observo homogeneidad de colores y formas a diferencia de la prueba pasada. En una caja se observo una mancha de color blancuzca de gran tamaño la cual estaría formada por miles de colonias. Se observo puntos diminutos que tenían la apariencia de migas de pan.
Se formo una gran mancha y aparte se pudieron contar aproximadamente 60 colonias. Se pudo observar manchas o pintas diferentes a las colonias normales.
De las muestras observadas en el microscopio pudimos observar una mancha blanca que al parecer tenia superficie lisa y una especie de cadena que estaba formada por burbujas.
OBSERVACIONES
› Los resultados obtenidos se pudo alterar el resultado puesto que el control que se le realizo a las cajas tenían hongos, lo cual nos indica que el agar no se preparo de la forma correcta.
› En la practica que se realizo en esta ocasión si se taparon las cajas petri con cinta para evitar la entrada de moscos como ocurrió en la practica pasada.
CONCLUSIÓN
Con la práctica realizada en el laboratorio de microbiología practicamos un método para el conteo de hongos en alimentos. En este caso el método que se utilizo fue el conteo por placas el más utilizado. Aprendimos a manejar equipos del laboratorio de microbiología que no utilizamos en el laboratorio de química.
› Los resultados obtenidos se pudo alterar el resultado puesto que el control que se le realizo a las cajas tenían hongos, lo cual nos indica que el agar no se preparo de la forma correcta.
› En la practica que se realizo en esta ocasión si se taparon las cajas petri con cinta para evitar la entrada de moscos como ocurrió en la practica pasada.
CONCLUSIÓN
Con la práctica realizada en el laboratorio de microbiología practicamos un método para el conteo de hongos en alimentos. En este caso el método que se utilizo fue el conteo por placas el más utilizado. Aprendimos a manejar equipos del laboratorio de microbiología que no utilizamos en el laboratorio de química.
MICROSCOPIO...
EL MICROSCOPIO.
PARTES DEL MICROSCOPIO Y SUS CONSTITUYENTES.
objetivos.
Esta constituido por lentes ocular y objetivo los cuales pueden amentar su tamaño 10X veces. Encontramos normalmente 3 objetivos (4X, 10X, 40X) montados en una base giratoria que permite intercambiar para aumentar, en forma creciente el tamaño de la imagen. Tenemos dos clases de objetivos en seco y lo de inmersión. condensador.
El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente.
oculares
oculares
Los oculares Las lentes oculares ISIS le permiten trabajar con el microscopio que ya posea, pero de manera más eficaz y precisa, con una mayor comodidad y menos fatiga, incluso en períodos de uso prolongados.
tubo optico.
Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
fuente luminosa
El sistema de iluminación esta conformado por tres componentes los cuales son los diafragmas, el condensador, espejo la luz puede ser natural o artificial de tal amaneara que ilumine la preparación u objeto que se va a observar al microscopio.
SISTEMA MECANICO.
BASE
Apoyo del microscopio y tiene por lo general la forma de y o rectangular.
Sirve de base al microscopio y tiene el peso suficiente para dar estabilidad al aparato.
TORNILLO MACROMETRICO
Girando este tornillo se asciende o desciende el tubo de del microscopio deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten enfoque rápido de la preparación.
mueve la platina hacia arriba y hacia abajo
TORNILLO MICROMETRICO
Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
enfocar con precisión
Base plana, de vidrio, donde se ponen las preparaciones para su observación en el microscopio. Con el macro métrico puedes subir y bajarlo hasta a conseguir un primer enfoque óptimo.
Para colocar la muestra a analizar o el objeto TORNILLO AJUSTE PLATINA
Parte circular metálica
Permite precisar la posición de la platina para enfocar el objetivo
TORNILLO DEL TOPE
Parte circular metálica
Impide que la platina no sobrepase su tope
PINZAS DE LA PLATINA
Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa.
Sostienen el cubreobjetos
Parte metálica accionable
Facilita ubicación del condensador
TORNILLO DEL CONDENSADOR
Forma circular
Permite subir y bajar la platina para dar buena iluminación.
MATERIAL MICROBIOLOGICO.
- grupo 1 (ABMM) balanza analitica
balanza
- autoclave
pH-metro
- vortex
cuenta colonias
- baño maria.
- camara de anaerobios.
incubadora
GRUPO 3 UTENSILIOS DE USO ESPECIFICO.
- gradilla
- pinzas crisol
- pinzas tubo de ensayo
ANALISIS MICROBIOLOGICO
ANALISIS MICROBIOLOGICO A PRODUCTOS DE PANIFICACION.
PRODUCTO: pan de frutas (aprendiz sena).
TIPO DE ANALISIS: mohos y levaduras
EQUIPOS Y AGAR EMPLEADOS:
- balanza gramera.
- autoclave
- tubos de ensayo
- gradilla
- vortex
- stomaker
- cajas petri
- pipetas
- pipeteador
- elernmeyer
- agar saboraut
- agua pectona
- muestra
PROCEDIMIENTO.
. pesamos 10 gramos de muestra con 90 ml de agua pectona estas sera ala solucion 10-1 para nuestro caso una muestra solida se realiza la homogenizacion en un stomaker.
· Desinfectamos con alcohol al 70% el sitio donde estraimos la muestra.
· Preparamos la dilución 10-2 transfiriendo 1 ml de la dilución 10-1, con pipeta de
1 ml a un tubo de dilución que contenga 9 ml de agua peptonada 0.1%, agitar cuidadosamente.
· Preparamos la dilucion10-3 transfiriendo 1 ml de la dilución 10-2, con pipeta de
1 ml a un tubo de dilución que contenga 9 ml de agua peptonada 0.1%, agitar cuidadosamente.
· Antes de sembrar homogenizamos la muestra con el vortex.
· tomamos 1 ml de la dilución a sembrar y se coloca el inoculo en una caja de petri. se Simbrar 2 caja por cada dilución
· alistamos el medio caliente (45ªC) y servimos aproximadamente de 15-20 ml de agar por caja.
· homogenizamos el inoculo haciendo formas de 8 sucesivamente en ambas direcciones. (otra manera: Moviendo la caja de arriba hacia abajo 5 veces, rotar la caja 5 veces en el sentido de las agujas del reloj, mover la caja 5 veces haciendo ángulo recto sobre el movimiento, rotar la caja 5 veces en el sentido contrario de las agujas del reloj.
· llevamos a incubar a 37ºC durante 48 horas se puede realizar atemperatura ambiente o en la incubadora.
·realizamos control de esterilidad del agua peptonada 0.1%, incubando una caja que contenga 1 ml de agua peptonada y agar saboraut.
· Se hace el recuento en ufc/gr Cálculo e interpretación:
· Seleccionar la caja que presente entre 25 y 250 colonias
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